 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
|
| Двойного изотопного разбавления Конкурирующего связывания белка Способом тсх Карбоксиметиловые эфиры Стероидов Очень важно Стеклянная посуда силилированная Дду дду дду Эстриол глюкуро нид |
Продукты обмена2.2.13. РАДИОИММУННЫЙИ ДРУГИЕ РАДИОИЗОТОПНЫЕ Способы АНАЛИЗА Способы с применением стероидов, меченных радиоизотопами, находят широкое применение для определения стероидных гормонов в биологических объектах. Такое положение существовало уже 20—25 лет назад, но не так давно роль радиоизотопных способов возросла благодаря развитию и быстрому распространению способов связывания белка (как правило радиоиммунных). Это привело в одно и тоже время к снижению роли «классических» радиоизотопных способов. В следствии этого очень большой материал, опубликованный по этим вопросам, будет обсуждаться очень кратко и более внимания будет уделено современным методам. Способ радиоактивных индикаторов Контроль за полнотой разделения и экстракции — область, в коей способ с применением меченых стероидов до сих пор остается незаменимым. Из многочисленных работ, посвященных этому вопросу, тут будет представлено лишь некоторое количество типичных примеров. Фейркло и др. (230) исследовали разделение стероидов на колонках, заполненных липидексом. Степень разделения контролировалась по радиоактивности фракций с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика. Стероидами, применяемыми в этих исследованиях, были ( 1 а,2а-3Н) -прогестерон, (4-14С) -тестостерон, (4-14С) -дегидроэпи-андростерон, (6,7-3Н)-эстрон и т. п., а радиоактивность колебалась в интервале 10—58 Ки/ммоль. Неплохой образчик применения радиоизотопов для исследования метаболизма приведен в статье Матсуи и др. (529). Авторы изучали продукты обмена тестостерона и 17-сульфата тестостерона, выделяющиеся с желчью у крысы, с помощью 4-14С- и 7-3Н-производных поэтому. Гидроксилированные и конъюгированные продукты обмена разделяли способом колоночной хроматографии на сефадексе ЬН-20 и амберлите ХАЭ-2. В последствии сольволиза полученных конъюгатов свободные стероиды разделяли способом ТСХ; продукты обмена определяли с помощью автосканирующего устройства и измеряли активность на жидкостном сцинтилляционном счетчике в последствии элюирования из соскобленных пятен. В случае если стероид, который очень важно квалифицировать в сложных биологических образцах, имеется в меченой форме, его надо добавить к экстракту, чтобы после чего обнаружить фракцию, содержащую искомый стероид, и количественно квалифицировать его каким-либо аналитическим способом. |
| Меченых стероидов | |