 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
|
| Андрогены прогесто гены Случае мишень анализа Кетогруп снс Ацетильное производное Образовании кетопроизводных следует |
Помощью масс фрагментографииМатерн и др. (126) использовали ферментативный иммунный способ для определения желчных кислот сыворотки. В качестве ферментативного комплекса пользовались холилглицин-перок-сидазу и связанное с сефарозой антитело, обладающее специфичностью сравнительно свободных и связанных желчных кислот. Определение основано на реакции пероксида водорода с 5-аминосалициловой кислотой, катализируемой пероксидазой (поглощение изменяли при 492 нм).«.2.8. МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЯ И РОДСТВЕННЫЕ Способы Применению масс-спектрометрии для идентификации желчных кислот приурочены к многочисленные статьи и доскональные обзоры (33, 52, 171, 172). Обыкновенно ионизацию воплотят в жизнь пучком электронов, но описано тоже успешное использование и химической ионизации (466, 108а, 175, 181, 183). При определении желчных кислот в сложных биологических образцах очень важно независимым способом подтвердить данные, полученные с помощью газовой хроматографии (основным образом данные по содержанию минорных компонентов), для чего газовую хроматографию обыкновенно комбинируют с масс-спек-трометрией (ГХ—МС). Во многих газохроматографических методах, обсуждавшихся в разд. 6.2.5, применяется масс-спектро-метрическая идентификация пиков (2, 42, 78, 108, 138, 181). Масс-спектрометрия как способ количественного анализа тоже купила некоторое значение для определения желчных кислот. При анализе таких сложных смесей, как желчь или же другие биологические жидкости, содержащие желчные кислоты сообща с другими липидами, расшифровать газовую хромато-грамму порой тяжело даже с помощью масс-фрагментографии с многоканальным детектором. Трудности расшифровки можно решить, используя подобающий внутренний стандарт и сочетая ГХ—МС с ЭВМ. Таким методом Миязаки и др. (128) идентифицировали и количественно определяли желчные кислоты ,и их конъюгаты в желчи. Внутренним стандартом служили дей-терированные желчные кислоты. Прототип желчи экстрагировали, проводили гидролитическое удаление сульфогрупп, щелочное гидролитическое расщепление глициновых и тауриновых конъюгатов и получали триметилсилиловые метиловые сложные эфиры 26. Выделенные фракции исследовали с помощью масс-фрагментографии. Главными фрагментами, используемыми для анализа и вычислений, были ионы с т/е 253, 343 и 368 для хо-левой кислоты, 255, 345, 355 и 370 для дезокси- и хенодезокси-холевой кислот. Эти фрагменты можно получить из триметил-силиловых метиловых сложных эфиров при отщеплении 1, 2 или же 3 молекул триметилсиланола и (или же) боковой цепи при С-17 и 19-ангулярной метильной группы. Идентификация и количественное определение персональных компонентов в пребывании изомеров и примесей основано на использовании большого различия в условных интенсивностях упомянутых выше пиков фрагментов, которое можно заложить в ЭВМ перед проведением масс-хроматографического исследования. |
| Тестостерона эфиры тестостерона Разделения стеринов | |