 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
|
| Денситометрических способов Возбуждение испускание Способ Время удерживания холестана Эстрадиола мкг фенилпропионат Профиль концент тмс |
Смесью хлороформаИз большого колличества примеров применения метода элюирования пятна в аналитической химии стероидов упомянем лишь некоторые более характерные (в дополнение к разобранным в других разделах этой главы).Уол и сотр. (821) определяли ацетат тренболона (ацетат 173-окси-4,9,11-эстратриен-З-она) и этинилэстрадиол в корме для свиней, разделяя экстракт способом ТСХ с последующим элюированием компонентов хлороформом, газохроматографиче-ским разделением и количественным определением. Тренболон и его ацетат определяли тоже Эрле и др. (600) в последствии хрома-тографирования на силикагеле с помощью системы хлороформ— этилацетат (2:1). Положение пятен определяли визуально в УФ-свете при 366 нм в последствии выдерживания пластинки в парах концентрированной соляной кислоты. Возникающую при всем при этом флуоресценцию можно использовать для полуколичественного определения нанограммовых количеств. Для количественного определения пятна элюируют эфиром, выпаривают досуха и обрабатывают 50 %-ной фосфорной кислотой в метаноле. Флуоресценцию измеряют при 498 нм (возбуждение при 365 нм). Для определения прегнандиола и прегнантриола в моче Бабьюк и сотр. (50) предложили следующую методику. В последствии ферментативного гидролиза и экстракции хлороформом пробу мочи помещают на пластинку, покрытую силикагелем, устанавливают положение сообразных зон, опрыскивая край полоски смесью серной кислоты с этанолом, и экстрагируют пятна смесью хлороформа с этанолом (17:3). В последствии выпаривания экстрактов персональные стероиды определяют или колориметрически с серной кислотой (длина волны 425 и 435 нм поэтому), или способом газовой хроматографии в виде их триметилсилиловых эфиров. Особенного упоминания заслуживает комбинированный ТСХ — фотометрический способ Хакла (332) определения дегидроэпи-андростерона в моче, поскольку тогда воспитание производных (реакция 17-кетогруппы с 2,4-динитрофенилгидрази-ном) проводится до хроматографирования. Образующиеся гид-разоны хорошо разделяются на силикагелевой пластинке смесью хлороформа с ацетоном (95:5), и в последствии экстракции метанолом динитрофенилгидразон дегидроэпиандростерона можно непосредственно квалифицировать спектрофотометрически. Тонкослойную хроматографию используют тоже при разделении отпечатков примесей в лекарственных веществах для дальнейшего масс-спектрометрического анализа; это было сделано Лоджем и Тофтом (510) при установлении профиля концентраций примесей в норэтистероне и его ацетате. Количественные способы 1П В случае если требования к точности определения разрешают использовать полуколичественные способы, интенсивность пятен часто оценивают визуально путем сравнения со стандартными пятнами или же рассчитывают концентрацию компонента по минимальному объему раствора сравнения, коим надо обработать слой для получения заметного пятна (126). |
| Газовой хроматографии стероидов Анализе стероидов | |