 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
|
| Специфичность метода Мкл сыворотки Скорости расхода кислорода Основан амперометрическом определении Качестве внутреннего стандарта Двойной связи Холестерина сыворотке крови Либермана бурхарда |
Сравнению газовой хроматографиейХотя возможности высокоэффективной жидкостной хроматографии применяются не так полно, как возможности газовой хроматографии, на основании фундаментальной статьи Риса и др. (241), шшводивших разделение на колонке с обращенной фазой 1ы-бондапак С18 смесью метанол—хлороформ—вода (71:16:13), можно заключить, что основная масса необходимых стеринов (холестерин, ситостерин, кампестерин, брассикастерин и др.) можно разделить и в свободном виде, и в форме ацетатов. Хорошо разделяются и некоторые «трудные пары», к примеру 5а/р-холестанолы, тогда уже как другие разделить невозможно, и в целом следует заключить, что применение ВЭЖХ на взгляд разделения не является шагом вперед по сравнению с газовой хроматографией.И все же есть один момент, когда ВЭЖХ имеет определенные выдающиеся качества по сравнению с газовой хроматографией. При изучении сложных смесей стеринов разделенные с помощью ВЭЖХ чистые компоненты значительно легче после чего иденти-- фицировать или же изучать их структуру спектроскопическими методами (241). В качестве примера можно привести работу Гюнтера и др. (120), успешно разделивших и выделивших холестерин. из 500-кратного избытка растительных стеринов, и работу Ределя и Капиллона (240), разделивших тяжелую эпи-мерную пару 25К- и 255-26-оксихолестеринов. Интересно, что холестерин был одним из первых веществ, проанализированных непосредственно комбинированным способом ВЭЖХ и масс-спектрометрии (258). В качестве отличного примера применения ВЭЖХ в анализе липидов (3) можно привести работу Картера и сотр. (46), использовавших колонку с силикагелем для отделения холестерина и его эфиров от других сывороточных липидов, и работу Кэррола и Руделя (45а), применивших тем же целей колонку с обращенной фазой зорбакс 005. Колин и др. (54) сообщили об успешном использовании ВЭЖХ для разделения стеринов растительного происхождения. Их работа заслуживает особенного упоминания, поскольку представляет собой первый случай использования колонки с пиро-графитом в анализе стеринов (элюент хлороформ—метанол в соотношении 3:2). Дункан и др. (68) определяли свободный и общий сывороточный холестерин способом ВЭЖХ на колонке с неподвижной фазой ^-бондапак С18 при элюировании смесью 2-пропанол—ацетонитрил—вода (6:3: 1). Содержание свободного и общего холестерина находили по площади пика холестерина до и в последствии омыления. |
| Ферментативного метода Ферментативном определении холестерина Кислорода процессе реакции | |