 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
|
| Эфира уксусной кислоты Пламенно ионизационного детектора Способом газовой хроматографии Эфиров холестерина Детектора электронного захвата Тмс эфир ацетат Высокоэффективная жидкостная хроматография |
Двойных связейКак уже упоминалось, чистый силикагель не является довольно подобающим адсорбентом для решения большого числа задач. Результаты можно гораздо улучшить, в случае если для разделения стеринов с разной степенью ненасыщенности и различным положением двойных связей применять силикагель, обработанный нитратом серебра (обыкновенно 5—15%) (11, 51, 58, 122, 147, 189, 231). В основе этого метода лежит воспитание я-комплексов между ионами серебра(I) и двойными связями. При разделении стеринов подобающим носителем для нитрата серебра служит тоже оксид алюминия (135).Для разделения эпимерных пар стеринов больше эффективна хроматография с применением других адсорбентов, тем более оксида магния (136) или же смеси его с силикагелем (аназил В) (23, 147). Это иллюстрируется табл. 4.2, составленной на основании данных Найтса (147). В этой таблице наряду с данными, свидетельствующими о скверном разделении отдельно на сили-кагеле и оксиде алюминия, приведены данные, иллюстрирующие приподнятое разделение ненасыщенных стеринов на силика-геле, содержащем нитрат серебра. Тут же можно видеть, что на аназиле В можно удовлетворительно разделить такие «трудные пары» стеринов, как кампестерин и 5-эргостенол, различающихся только конфигурацией 24-метильных групп. Другой метод улучшения разделения заключается в применении распределительных хроматографических систем, содер- Таблица 4.2. Разделение ацетатов стеринов способом тонкослойной хроматографии а (147) 20 % А§Ш3 Оксид алю- Аназил В на силикагеле миния (5Ю2 + М§0) Исходный стерин Силикагель Холестерин Холестанол Кампестерин 5-Эргостенол Ситостерин 7-Дегидрохолестерин Брассикастерин Стигмастерин Эргостерин 1,00 1,26 1,06 1,06 1,06 0,10 0,56 0,81 0,05 1,00 1,02 1,03 1,01 1,03 0,71 0,91 1,00 1,00 1,02 1,04 1,00 1,10 0,80 1,10 1,10 0,84 1,21 1,12 1,17 0,78 1,03 0,90 0,61 0,88 0,58 а Система растворителей: 1 %-ный раствор диэтилового эфира в петролейном эфире. Величины отнесены к ацетату холестерина. жащих силикагель или же кизельгур, пропитанных парафином или же низшими углеводородами, в сочетании с различными подвижными фазами (57, 58, 62). В последние годы эти системы, по-видимому, некоторое количество утратили свое значение. Следует заметить, что похожего рода разделения протекают гораздо легче, в случае если в качестве адсорбента использовать силанизирован-ный силикагель (289). Что касается проведения химических реакций перед хрома-тографическим разделением стеринов, то, по-видимому, следует считать, что этерификация 3-оксигруппы с образованием ацетатов, бензоатов и т. д. приводит к улучшению разделения. Бромирование (41, 58) или же эпоксидирование (13) двойных связей в ядрах стероидов разрешает разделить насыщенные и ненасыщенные стерины. |
| Определение эргостерина Холестан холестан | |